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利用ImageXpressMicro进行长时间活细胞成像和心肌细胞功能评价

时间:2022-11-07 00:36
本文摘要:活细胞光学技术是最近几年蓬勃发展的一项技术,需要在细胞相似生理的状态下仔细观察细胞形态转变和蛋白的传达,该技术需要防止传统使用相同细胞或的组织的研究方法中,相同细胞过程中导致的细胞形态的转变和结构转变,需要更为现实的体现出有细胞的特性,因而甚广不受尊崇。

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活细胞光学技术是最近几年蓬勃发展的一项技术,需要在细胞相似生理的状态下仔细观察细胞形态转变和蛋白的传达,该技术需要防止传统使用相同细胞或的组织的研究方法中,相同细胞过程中导致的细胞形态的转变和结构转变,需要更为现实的体现出有细胞的特性,因而甚广不受尊崇。MDImageXpressMicro低内涵系统具备多种特性需要展开宽约数天的活细胞的仔细观察,同时,由于使用知名的MD软件产品MetaMorph为基础的MetaXpress低内涵分析软件,具备极高的灵活性和拓展能力,除活细胞光学之外还需要需要对某些细胞(如心肌细胞)的生理药理特性展开评价。

  神经细胞长时间光学  神经细胞是普遍认为的更为脆弱和薄弱的细胞,对于外界环境更为脆弱。对于活的神经细胞的长时间培育和仔细观察具备较小艰难。使用ImageXpressMicro系统需要构建神经细胞的长时间仔细观察培育。  方法:  从新生大鼠大脑海马取得大约1立方毫米大小的组织块。

迁移所含0.25%胰酶的离心管中37℃,5%CO2孵育箱内消化20~30min。重新加入含胎牛血清的培养液中止消化,离心轻覆细胞,按0.6105/ml铺于96孔板中。24h后换为NeurolbasalMedium/B27无血清培养液,以后每2~3d半量换液1次。

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7d后取得原代神经细胞。  图像提供:  将样品放进有环境掌控功能的MDImageXpressMicro低内涵系统内,使用激光自动探讨展开样品探讨,在10X物镜下间隔5分钟展开一次差距图像摄制,结果如下:  小结:  ImageXpressMicro使用的环境控制系统需要保持细胞所需的温度、湿度和CO2条件,其中温度为细胞的酶活性获取了温度确保,保证细胞的生理机能,湿度保持需要确保细胞外液会冷却,防止了胞外渗透压的增高导致的细胞水解,CO2需要保持细胞外液的pH值。  除了保持细胞的生存环境外,在展开脆弱、薄弱细胞(如神经细胞)的长时间仔细观察过程中,尤为最重要的是增大对细胞的性刺激,尽量的维持细胞的活性。ImageXpressMicro使用激光自动探讨技术,在探讨的过程中,细胞需要受到光照,这样就防止了细胞内的光化学反应和光照加剧,需要很好的保持细胞的活性状态。

因此,在长时间活细胞的仔细观察过程中,以上两点不可或缺。


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